Создан молекулярный вектор pBi101-IL18 с геном, кодирующим зрелую форму интерлейкина-18 человека (ИЛ-18). Методом агробактериального переноса получены трансгенные растения табака, среди которых отобрано 6 моноинсерционных форм. Наличие последовательности ИЛ-18 подтверждали ПЦР анализом и методом Саузерн-блот гибридизации (рис.1). Уровень экспрессии белка на основании результатов Вестерн-блота в тканях трансгенных растений табака составил более 0,01% общего растворимого белка (рис.1). Полученные растения могут являться эффективным продуцентом интерлейкина-18 человека, используемого в качестве иммуномодулятора в медицине.
Рис. 1. Блот-гибридизация геномных ДНК у трансгенных растений табака с меченым фрагментом кДНК гена ИЛ-18 человека (две хроматограммы слева) и Вестерн-блот анализ интерлейкина-18 человека у трансгенных растений табака (хроматограмма справа).
|